EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是雙鏈DNA病毒，人群普遍易感。通常EBV的原發(fā)感染是非致命的，但病毒的再激活可以導(dǎo)致極少數(shù)感染者出現(xiàn)細(xì)胞因子風(fēng)暴、噬血細(xì)胞淋巴組織增生癥（hemophagocytic lymphohistiocytosis，HLH）、 EBV相關(guān)淋巴組織增生性疾?。‥BV-associated lymphoproliferative disorders，EBV-LPD），甚至進(jìn)展為惡性淋巴瘤和白血病。

      慢性活動(dòng)性EBV感染(CAEBV)是由EBV持續(xù)感染T淋巴細(xì)胞或自然殺傷NK細(xì)胞引起的一種淋巴增生性疾病，主要表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞增生和EBV組織浸潤(rùn)。部分患兒可發(fā)展為炎性細(xì)胞因子風(fēng)暴和噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥(HLH)。CAEBV的臨床病程是異質(zhì)性的，目前缺之有效的治療策略。雖然糖皮質(zhì)激素和其他免疫抑制劑可以暫時(shí)改善臨床病程，患者最終仍需進(jìn)行造血干細(xì)胞移植(HSCT)。如果沒有有效的治療，CAEBV可能會(huì)發(fā)展為淋巴瘤或嚴(yán)重的全身性炎癥，甚至死亡。先前的研究表明t細(xì)胞型CAEBV患者的病程更具侵襲性，生存期明顯較短。NK細(xì)胞型CAEBV患者通常癥狀較輕，臨床預(yù)后較好。

      本文探討了小兒CAEBV患者外周血EBV感染淋巴細(xì)胞亞型的臨床特點(diǎn)，旨在分析EBV感染細(xì)胞類型與臨床表現(xiàn)的關(guān)系，早期發(fā)現(xiàn)危重患兒，采取有效治療。

方法學(xué)

      采用流式細(xì)胞術(shù)和定量聚合酶鏈反應(yīng)(QPCR)檢測(cè)2017年7月至2022年7月CAEBV患者外周血EBV感染CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和CD56+自然殺傷(NK)細(xì)胞的水平。

結(jié) 論

      共對(duì)112例CAEBV患兒進(jìn)行了評(píng)估，其中CD4+型44例，CD8+型21例，CD56+型47例。CD8+t細(xì)胞型患者出現(xiàn)皮疹的頻率顯著高于CD4t細(xì)胞型患者，而肝腫大在CD4+細(xì)胞型患者中更為常見?？傮w而言，CD8+細(xì)胞患者的總生存率最低（P =0.017）。化療聯(lián)合造血干細(xì)胞移植(HSCT)患者預(yù)后較好(P =0.001)。在多因素分析中皮疹、噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增多癥、CD8+細(xì)胞型、治療后血漿EBV-DNA未下降是預(yù)后不良的獨(dú)立指標(biāo)（P值分則為0.002、 0.024、 0.022、 0.0121）。

結(jié)果 1 入組患者的臨床特征

      共納入112例CAEBV患兒，其中男童60例，女童52例(男女比例1.15:1)，中位年齡6.51羅(范圍0.58,14.33)。在本次的研究中，所有患者都沒有潛在的病理增加對(duì)EBV疾病的易感性。106例患者有發(fā)熱，83例有淋巴結(jié)腫大，78例有肝腫大，71例有脾腫大。42例患兒出現(xiàn)骨髓噬血細(xì)胞增多，56例患兒合開HLH。入組兒童血漿EBV-DNA載量為1.665 X103(5.00X102-8.93X106)copies/ml，而全血EBV-DNA載量為3.29X106(5.00X102-4.12x107)copies/mL。

結(jié)果 2 ebv感染的細(xì)胞亞群

      采用流式細(xì)胞術(shù)和gPCR檢測(cè)112例患兒ebv感染淋巴細(xì)胞亞型。結(jié)果顯示，84例患者T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞均有EBV感染，12例患者T細(xì)胞和NK細(xì)胞均有感染，4例患者僅感染T淋巴細(xì)胞，5例患者僅感染NK細(xì)胞。根據(jù)EBV-DNA在淋巴細(xì)胞中的最高載量，CD4+細(xì)胞型、CD8+細(xì)胞型和CD56+ NK細(xì)胞型的數(shù)量分別為44、21和47。對(duì)所有患者進(jìn)行了不同部位的組織活檢：96例骨髓、70例淋巴結(jié)、14例皮膚、5例胃腸道、4例肝臟和3例腫瘤(1例在鼻咽、1例在唇部和1例在匡周區(qū)域)。活檢結(jié)果與ebv相關(guān)的T/NK細(xì)胞淋巴增生性疾病表型一致。文章發(fā)現(xiàn)CD8+細(xì)胞型患者皮疹發(fā)生率明顯高于CD4+細(xì)胞型患者，肝腫大發(fā)生率則更高。不同亞型患者病理分級(jí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P= 0.05)。我們還分析了血清細(xì)胞因子IFN-Y、TNF-、IL-2、IL-4、L-6和IL-10的水平。血清細(xì)胞因子水平在CAEBV不同病理分級(jí)及不同淋巴細(xì)胞亞型間無顯普差異(P> 0.05)。

結(jié)果 3 預(yù)后分析

      住院后，將112例患者根據(jù)治療方法分為2組：化療組79例(63例進(jìn)一步行HSCT)果用DEP/L-DEP治療；另一治療組33例患者僅接受激素和抗病毒治療。截至2022年12月31日的最后一次隨訪，15名患者死亡，其中6人死于移植后并發(fā)癥，9人死于疾病進(jìn)展(1人在HSCT后發(fā)展為活動(dòng)性HLH。8人未進(jìn)行HSCT)。中位隨訪時(shí)間為3.36(0.15- 5.48)年。3年總生存率(OS)為79.3%(SD 6.1%)(下圖A)。HLH患兒3年OS率顯著低于無HLH患兒(67.3%SD 10.7%] vs 91.3%[SD 5.3%]，P= 0.014;下圖 B)。然而，接受或未接受HSCT的患者無顯者差異(84.5%[SD 6.2%] vs 72.1%[SD 10.2%]，P = 0.166;下圖C)。III級(jí)患者的3年OS率低于I級(jí)患者(50.0%[SD 35.4%] vs 88.0%[SD5.2%]， P= 0.020)(下圖D)。

      在比較不同淋巴細(xì)胞亞型時(shí)，本文發(fā)現(xiàn)CD8+細(xì)胞型患者與CD4+細(xì)胞型和CD56 NK+細(xì)胞型患者相比，3年OS率最低(80.9%[SD 11.4%] vs 53.2%[SD 14.6%] vs 91.3% [SD]4.2%]， p=.017;下圖A)。此外，HLH患者的3年OS率在CD8+細(xì)胞類型上也低于無HLH患者(37.0%[SD 18.1%] vs 75.0%[SD 21.7%], P = 0.045;下圖B-D)。

      本文還分析了不同治療方法對(duì)CAEBV的預(yù)后。化療組和其他治療組的3年OS率沒有差異，而接受化療并進(jìn)一步進(jìn)行HSCT的患者的3年OS率高于未進(jìn)行HSCT的患者(下圖A和B)。無論是否化療后進(jìn)行HSCT，CD8t細(xì)胞類型患將的3年OS最低(下圖C和D)。相比之下，其他治療組不同亞型之間的OS率無差異(下圖E)。

      5例患者僅在CD56+ NK細(xì)胞中發(fā)生EBV感染，其中3例接受化療和HSCT，該5例患者均存活。

討 論

      CAEBV的不同臨床表現(xiàn)可能與不同的淋巴細(xì)胞亞型有關(guān)。木研究患者感染部位以T淋巴細(xì)胞為主，占58.0%。其中CD4+T細(xì)胞感染占67.7%。這與以往的研究一致，CAEBV的異常T細(xì)胞群通常為CD4+。本研究表明，CD8+T細(xì)胞型患者更容易出現(xiàn)皮疹，而CD4+t細(xì)胞型患將更容易出現(xiàn)肝腫大。本文證明在不同ebv感染的CAEBV淋巴細(xì)胞亞型中，這些細(xì)胞因子的高水平與病理分級(jí)之間沒有關(guān)系。ebv相關(guān)疾病可能有不同的發(fā)展過程。

參考文獻(xiàn)

Wei A, Ou W, Zhao Y, Ma H, Zhang L, Lian H, Zhao X, Zhang Q, Wang D, Li Z, Wang T, Zhang R. Clinical characteristics of peripheral lymphocyte subtypes in chronic active Epstein-Barr virus infection. J Infect Dis. 2023 Oct 3:jiad435. doi: 10.1093/infdis/jiad435. Epub ahead of print. PMID: 37787605.